www一区,日本中文字幕乱码免费,成人性生交大片免费看,色综合欧美在线视频区

返回首頁 在線留言 聯(lián)系我們
首頁 > 技術(shù)支持 > 對乳制品中進(jìn)行內(nèi)酰胺酶檢測的方法分享

技術(shù)支持

對乳制品中進(jìn)行內(nèi)酰胺酶檢測的方法分享
更新時間:2022-06-21 文章更新于2022-06-21  點(diǎn)擊次數(shù):924次
  乳中抗生素的來源主要有兩種途徑,一是采用β-內(nèi)酰胺類抗生素治療牛乳腺炎造成牛乳中抗生素殘留,二是奶牛長期喂飼含抗生素的飼料,很容易造成乳中抗生素殘留川。飲用含有抗生素的牛奶可能導(dǎo)致飲用者對抗生素的過敏反應(yīng),或因長期接觸抗生素而導(dǎo)致耐藥。泌乳奶牛經(jīng)過藥品合理間隔期后擠奶,可以減少抗生素在奶中殘留,實(shí)現(xiàn)無抗奶。因此,世界各國都嚴(yán)格限定原料乳抗生素最大殘留*'2。β-內(nèi)酰胺酶是由對β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥菌株分泌的一種胞外酶。該酶可選擇性分解β-內(nèi)酰胺類抗生素,能夠使青霉素內(nèi)酰胺結(jié)構(gòu)破壞而失去活性。由于利益驅(qū)動使得不法分子利用β-內(nèi)酰胺酶降解乳中所含抗生素。該酶的使用掩蓋了牛奶中實(shí)際含有的抗生素,導(dǎo)致青霉素、頭孢菌素等抗生素類藥物耐藥性增高,從而大大降低了人們抵抗傳染病的能力。
 
  對乳制品中進(jìn)行內(nèi)酰胺酶檢測的方法:
 
  1.范圍
 
  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類藥物的檢驗(yàn)方法。
 
  本標(biāo)準(zhǔn)適用于乳及乳制品中舒巴坦敏感β-內(nèi)酰胺酶類物質(zhì)的檢驗(yàn)。
 
  本方法的檢出限為4U/mL。
 
  2.原理
 
  該方法采用對青霉素類藥物絕對敏感的標(biāo)準(zhǔn)菌株,利用舒巴坦特異性抑制β-內(nèi)酰胺酶的活性,并加入青霉素作為對照,通過比對加入β-內(nèi)酰胺酶抑制劑與未加入抑制劑的樣品所產(chǎn)生的抑制圈的大小來間接測定樣品是否含有β-內(nèi)酰胺酶類藥物。
 
  3.操作步驟
 
  3.1 菌懸液的制備
 
  將藤黃微球菌接種于營養(yǎng)瓊脂斜面上,經(jīng)36士1℃培養(yǎng)18h-24 h,用生理鹽水洗下菌苔即為菌懸液,測定菌懸液濃度,終濃度應(yīng)大于1×1010 CFU/mL,4 ℃保存,貯存期限2周。
 
  3.2 樣品的制備
 
  將待檢樣品充分混勻,取1 mL待檢樣品于1.5 mL離心管中共4管,分別標(biāo)為:A、B、C、D,每個樣品做三個平行,共12 管,同時每次檢驗(yàn)應(yīng)取純水1 mL加入到1.5 mL離心管中作為對照。如樣品為乳粉,則將乳粉按1:10的比例稀釋。如樣品為酸性乳制品,應(yīng)調(diào)節(jié)pH值至6-7。
 
  3.3 檢驗(yàn)用平板的制備
 
  取90mm滅菌玻璃培養(yǎng)皿,底層加10 mL滅菌的抗生素檢測用培養(yǎng)基Ⅱ,凝固后上層加入5 mL含有濃度為1×108 CFU/mL藤黃微球菌的抗生素檢測用培養(yǎng)基Ⅱ,凝固后備用。
 
  3.4 樣品的測定
 
  按照下列順序分別將青霉素標(biāo)準(zhǔn)溶液、β-內(nèi)酰胺酶標(biāo)準(zhǔn)溶液、舒巴坦標(biāo)準(zhǔn)溶液加入到樣品及純水中:
 
  A 青霉素5 μL。
 
  B 舒巴坦25 μL、青霉素5 μL。
 
  C β-內(nèi)酰胺酶25 μL、青霉素G5 μL。
 
  D β-內(nèi)酰胺酶25 μL、舒巴坦25 μL、青霉素5 μL。
 
  混勻后,將上述A~D 試樣各200 μL 加入放置于檢驗(yàn)用平板上的4個無菌牛津杯中,36士1℃培養(yǎng)培養(yǎng)18~22 h ,測量抑菌圈直徑。每個樣品,取三次平行試驗(yàn)平均值。
 
  3.5 結(jié)果報(bào)告
 
  純水樣品結(jié)果應(yīng)為:(A)、(B)、(D)均應(yīng)產(chǎn)生抑菌圈;(A)的抑菌圈與(B)的抑菌圈相比,差異在3 mm以內(nèi)(含3 mm),且重復(fù)性良好;(C)的抑菌圈小于(D)的抑菌圈,差異在3 mm以上(含3 mm),且重復(fù)性良好。如為此結(jié)果,則系統(tǒng)成立,可對樣品結(jié)果進(jìn)行如下判定:
 
  6.1 如果樣品結(jié)果中(B)和、(D)均產(chǎn)生抑菌圈,且(C)與(D)抑菌圈差異在3 mm以上(含3 mm)時,可按7.1.1、7.1.2 判定結(jié)果。
 
  6.1.1(A)的抑菌圈小于(B)的抑菌圈差異在3 mm以上(含3 mm),且重復(fù)性良好,應(yīng)判定該試樣添加有β- 內(nèi)酰胺酶,報(bào)告β- 內(nèi)酰胺酶類藥物檢驗(yàn)結(jié)果陽性。
 
  6.1.2(A)的抑菌圈同(B)的抑菌圈差異小于3 mm,且重復(fù)性良好,應(yīng)判定該試樣未添加有β- 內(nèi)酰胺酶,報(bào)告β- 內(nèi)酰胺酶類藥物檢驗(yàn)結(jié)果陰性。
 
  6.2 如果(A)和(B)均不產(chǎn)生抑菌圈,應(yīng)將樣品稀釋后再進(jìn)行檢測。

分享到:

返回列表 | 返回頂部
上一篇 : 抑菌圈測量儀的功能特點(diǎn)    下一篇 :  抑菌圈測量儀的這些優(yōu)勢你都了解嗎?
網(wǎng)站首頁 公司簡介 產(chǎn)品中心 招聘中心 技術(shù)支持 企業(yè)動態(tài) 聯(lián)系我們 管理登陸
電話:0571-85124851 地址:杭州市西湖科技園西園八路11號B座405室
GoogleSitemap ICP備案號:浙ICP備06012639號-2 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)
方力
  • 電話

    0571-85020452

在線客服